プロテイナーゼ K パウダー CAS 39450-01-6

Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. は、中国でプロテイナーゼ K パウダー cas 39450-01-6 の最も経験豊富なメーカーおよびサプライヤーの 1 つです。ここで私たちの工場から販売する卸売バルク高品質プロテイナーゼ K パウダー cas 39450-01-6 へ​​ようこそ。良いサービスとリーズナブルな価格が利用可能です。

プロテイナーゼKパウダー非常に効率的な非特異的セリン プロテアーゼです。{0}主にタンパク質を分解し、核酸調製物から汚染タンパク質を除去するために、分子生物学や生化学で広く使用されています。これは真菌 Engyodontium album (以前は Tritirachium album) に由来しており、変性条件下で SDS (0.5 ～ 1%) または尿素 (4M) を含む溶液中でインキュベートした場合でも、幅広い温度 (20 ～ 60 度) および pH (4 ～ 12) にわたってその活性を維持します。

この酵素は、ペプチド結合を切断することにより (脂肪族/芳香族アミノ酸のカルボキシル末端を優先的に加水分解する)、RNase や DNase を含む幅広いタンパク質を効率的に分解するため、核酸の完全性を確保するための DNA/RNA 抽出におけるヌクレアーゼ除去に使用されます。さらに、組織消化 (パラフィン包埋サンプルなど)、細胞溶解、プロテオミクス研究にもよく使用されます。

プロテイナーゼ K 粉末は通常、凍結乾燥された形で供給されます。安定性が高く (-長期保存の場合は 20 度)、使用前に緩衝液 (例: トリス-HCl、EDTA) に溶解する必要があります。その活性は Ca2+ に依存しますが、EDTA などのキレート剤は酵素活性を部分的に阻害するだけです。取り扱い中は自己劣化を避ける必要があり、65 度での熱不活化が推奨されます。強力なタンパク質加水分解能力があるため、皮膚や粘膜への接触を避けるために慎重な保護が必要です。

プロテイナーゼKパウダープロテイナーゼ K または EC 3.4.21.14 としても知られる、トリチラキウム アルバム リンバーから単離および精製されたセリン プロテアーゼです。 Wolfgang Ebeling らによって最初に単離されて以来、 1974 年にプロテイナーゼ K は、その高い活性と広範な基質特異性により、生化学、分子生物学、医学、産業で広く使用されてきました。

DNA および RNA の抽出プロセスにおけるプロテイナーゼ K の主な機能は、核酸に結合したタンパク質を分解し、その後の抽出および精製のために DNA または RNA を溶液中で遊離できるようにすることです。プロテイナーゼ K は、尿素や SDS などの変性剤中での安定性と高い活性のため、プラスミドやゲノム DNA および RNA の単離に一般的に使用されます。

プロテイナーゼ K は RNAse の活性を阻害し、RNA を分解から保護します。

1. DNAおよびRNAの抽出

 

DNA 抽出: プロテアーゼ K は、DNA に結合するヒストンを加水分解し、溶液中で DNA を解離させることができます。その後、フェノールクロロホルム抽出、エタノール沈殿等の各種方法により不純物を除去し、精製されたDNAを回収した。
RNA 抽出: RNA 抽出プロセスでは、一般に RNA 酵素が環境中に存在し、サンプル系自体にも RNA 酵素が含まれる可能性があるため、RNA は非常に分解されやすくなります。少量を加えると、

2. In situ ハイブリダイゼーション技術

 

in situ ハイブリダイゼーション技術では、一般にプロテイナーゼ K がプレハイブリダイゼーション処理に使用され、標的 DNA の周囲のタンパク質を消化し、プローブが標的核酸に結合する可能性を高め、ハイブリダイゼーションシグナルを増強します。ただし、プロテイナーゼ K の濃度が高すぎる場合、消化時間が長すぎる場合、またはインキュベーション温度が高すぎる場合は、細胞構造に損傷を与え、組織切片の脱落や細胞核の消失につながり、ハイブリダイゼーションの結果に影響を与える可能性があることに注意する必要があります。したがって、実際の応用においては、プロテイナーゼKの濃度と処理時間を厳密に制御する必要があります。

3. ウイルスの不活化・消毒

 

プロテアーゼ K は、その強力なタンパク質分解活性により、ウイルスの不活化と消毒に使用できます。研究により、純水と家庭廃水を一定濃度のプロテイナーゼ K で処理すると、ウイルスを効果的に不活化できることが示されています。プロテアーゼ K はウイルス不活化消毒剤として、従来の酸化化学消毒剤による人体への潜在的な害を軽減することができ、その製造と輸送は不可逆的な環境汚染を引き起こすことなく安全です。

4. ウェスタンブロッティングとパルス電気泳動

 

プロテアーゼ K は、パルス電気泳動、ウェスタンブロッティング、その他の実験用の染色体 DNA の調製にも広く使用されています。ウェスタンブロット実験では、プロテイナーゼ K を使用してサンプルから非特異的タンパク質を除去できます。-これにより、ブロットの特異性と感度が向上します。パルス電気泳動実験では、プロテイナーゼ K は DNA サンプル中のタンパク質不純物を分解し、電気泳動効率を向上させることができます。

5. タンパク質の検出と同定

 

プロテイナーゼKパウダー特定のタンパク質の検出と同定にも使用できます。たとえば、伝染性海綿状脳症（TSE）の研究では、プロテイナーゼ K を使用して、脳組織サンプル内のタンパク質を消化したり、病原性プリオンのプロテイナーゼ K に対する耐性を検出することでプリオン タンパク質の存在を特定したりできます。さらに、プロテイナーゼ K は、細胞膜上の酵素の局在の決定やエンドトキシン（リゾチームやリゾチームなど）に結合したカチオン性タンパク質の除去などの実験にも使用できます。リボヌクレアーゼA)。

1. 医療分野

 

臨床使用: プロテアーゼ K は医学において一定の薬効を持っています。例えば、胃プロテアーゼによる消化不良の治療、酸性プロテアーゼによる気管支炎の治療、エラスターゼによる血管炎の治療などが挙げられます。さらに、トリプシン、キモトリプシンなどは、外科的化膿性創傷の浄化や胸膜漿膜癒着の治療にも一般的に使用されます。
ウイルスの検出と診断: プロテアーゼ K もウイルスの検出と診断に応用できる可能性があります。ウイルスサンプル中のタンパク質を消化してウイルス核酸を露出させることにより、その後の核酸検査が容易になります。

2. 産業分野

 

皮革産業: プロテアーゼ K は皮革産業で脱毛と柔軟化処理に使用されており、時間を節約し、労働衛生条件を改善することができます。
繊維産業: プロテアーゼ K は、シルクの精練などの繊維産業で使用できます。
食品産業: プロテアーゼ K は、食品産業で肉の軟化やアルコールの清澄などに使用できます。
洗剤：酵素入り洗濯洗剤は洗剤の新製品です。アルカリ性プロテアーゼを含む洗濯洗剤は、衣類についた血液汚れやタンパク質汚れを除去します。ただし、皮膚表面のタンパク質を傷つけ、発疹や湿疹などのアレルギー反応を引き起こす可能性があるため、使用する際は皮膚に触れないよう注意してください。

構造的特徴

 

プロテイナーゼ K の分子量は約 28900 ダルトン (28.9 kDa) で、29.3 kDa という文献報告もあります。そのアミノ酸配列と三次元空間構造はセリンプロテアーゼファミリーのズブチリシンによく似ていますが、いくつかのユニークな特徴もあります。-

ジスルフィド結合構造: プロテアーゼ K 分子にはジスルフィド結合が含まれており、これにより安定性が高まり、広い pH 範囲および高温条件下でも活性を維持できます。
Ca 2 ⁺ 結合部位:プロテイナーゼKパウダーには 2 つの Ca 2 ⁺ 結合部位が含まれており、これらは活性中心から遠く離れていますが、酵素の触媒活性を維持するために重要です。 Ca 2 ⁺ を除去するとプロテアーゼ K の活性が約 80% 失われ、Ca 2 ⁺ を再導入しても活性は部分的にしか回復できません。
触媒トライアド: プロテアーゼ K には、加水分解活性の重要な構造である触媒トライアド Asp-His69-Ser224 があります。

作用機序

 

プロテアーゼ K は、疎水性アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、芳香族アミノ酸の C{0}} 末端に隣接するエステル結合とペプチド結合を優先的に加水分解し、タンパク質を短いペプチドに加水分解します。その作用メカニズムには主に次のステップが含まれます。

酵素基質の結合: プロテアーゼ K が基質と混合された後、基質は酵素の活性部位に結合し、酵素基質複合体を形成します。
触媒反応: 活性部位の作用により、基質のペプチド結合が加水分解されて、酵素から分離された生成物が形成されます。
プロテアーゼ K の強力な分解効果により、プロテアーゼ K はさまざまな生化学反応、特に DNA および RNA の抽出プロセスにおいて重要な試薬となっています。プロテアーゼ K は、核酸に結合したタンパク質を効果的に分解し、核酸を放出し、ヌクレアーゼの活性を阻害して、抽出中の核酸の分解を軽減します。

プロテイナーゼKパウダーは、活性が高く基質特異的なセリンプロテアーゼとして、生化学、分子生物学、医学、産業において幅広い用途があります。核酸に結合するタンパク質を分解して核酸を放出する可能性があります。 in situ ハイブリダイゼーション技術でプローブが標的核酸に結合する機会を増やします。ウイルスの不活化と消毒に使用されます。ウェスタンブロットおよびパルス電気泳動実験でタンパク質不純物を除去します。医学の分野で薬効があります。皮革加工、繊維工業、食品工業、洗剤製造などの産業分野で使用されています。ただし、プロテイナーゼ K を使用する場合は、その安定性と活性を確保するために、その保存方法と使用条件に注意を払う必要があります。

プロテイナーゼ K は、その独特の酵素特性と安定性により、分子生物学、生化学、医学研究分野で広く使用されている広域スペクトルのセリン プロテアーゼです。{0}プロテイナーゼ K パウダーは、凍結乾燥粉末状であるため、核酸抽出、タンパク質消化、組織の均質化などの実験で重要な役割を果たします。{2}}ただし、生物学的試薬の使用には潜在的なリスクが伴い、その副作用により作業者の健康や実験環境の安全が脅かされる可能性があります。

人気ラベル: プロテイナーゼ K パウダー cas 39450-01-6、サプライヤー、メーカー、工場、卸売、購入、価格、バルク、販売用