IPTG パウダー CAS 367-93-1

Iptgパウダー局所麻酔の作用部位に使用でき、術後の創傷の痛みや潰瘍の痛みを軽減するための展着剤としても使用されます。{0}}青色および白色スポットのスクリーニングおよび IPTG で一般的に使用される分子生物学的試薬は、細菌におけるタンパク質発現を誘導しました。 IPTG、正式名イソプロピル- - D-チオガラクトシド、CAS 367-93-1、分子式 C9H18O5S、分子量 384.37 ダルトン、低分子化合物に属します。白色またはほぼ白色の粉末で、水への溶解度は低いですが、有機溶媒への溶解度は優れています。分子内にはイオン基が存在するため、水中ではある程度の導電性を持ちます。室温では安定ですが、高温や強酸・アルカリ条件下では分解しやすくなります。目立った臭気はありませんが、使用中に若干の有機化合物の臭気を発する場合があります。これは、細菌のタンパク質発現を誘導するために一般的に使用される誘導物質です。医療診断において、IPTG はサンプル中の特定の分子や組織を検出するための蛍光プローブまたは発色剤として機能します。 IPTGは標的分子と結合することで蛍光シグナルや色の変化を発生させ、疾患の診断を強力にサポートします。

Iptgパウダー、物理パラメータ、Mp. : 114 ~ 121 ℃、使用説明、一般的な分子生物学試薬。細菌における青白スクリーニングや IPTG- 誘導タンパク質発現によく使用されます。 、梱包仕様、1G、5G、25G、100G、1KG、保管条件

2～8度冷蔵、遮光、危険性の説明、危険コード：Xi、リスクレベル：R36 / 37 / 38、安全レベル：S23-24 / 25-36。

IPTG は、- ガラクトシダーゼ活性を誘導する必要があるクローニング実験でよく使用されます。これは、組換え細菌コロニーの青-スクリーニングに X-Gal または Bluo-Gal と組み合わせて使用​​されることが多く、Chemicalbook によって大腸菌で lac オペロンの発現を誘導できます。 IPTGはlacIリプレッサータンパク質に結合し、その立体構造を変化させて、-ガラクトシダーゼによってコードされるlacZ遺伝子の阻害を防ぎます。

IPTG、正式名イソプロピル- -D-チオガラクトシドは、タンパク質発現の誘導と制御に広く使用されている一般的な誘導剤です。 IPTG はその独特な構造と機能により、通常は次の方法で調製されます。Iptgパウダー研究室での合成方法。

Iptgパウダー正式名イソプロピル- - D-チオガラクトシドは、タンパク質発現の誘導と制御に広く使用されている一般的な誘導剤です。

1. タンパク質発現誘導:

IPTGはタンパク質発現誘導において重要な役割を果たします。細菌の特定の遺伝子の発現を効率的に誘導し、目的のタンパク質を短時間で得ることができる誘導剤として広く使用されています。その作用機序は、細菌の lacI 遺伝子に結合し、その転写調節タンパク質の活性を阻害し、それによって細菌の lac オペロンを開いて標的遺伝子の発現を開始することです。タンパク質発現のプロモーターとしてラクトースオペロンを使用する場合、インデューサーが必要であり、IPTG はラクトース類似体として作用し、大腸菌でのガラクトシダーゼの発現を誘導します。細胞がそれを利用して持続的な発現を達成することはできません。 IPTGはlacに結合します |生成物を生成し、lacO から離れた構造変化を引き起こし、それによって転写を活性化します。この誘導性転写制御は、大腸菌発現系ベクターの構築において一般的に使用される要素となっています。

2. 遺伝子発現制御：

 

IPTG は遺伝子発現制御において重要な役割を果たします。重要な実験試薬として、遺伝子発現制御やタンパク質の過剰発現実験に重要な役割を果たします。 IPTGの添加時間と濃度を制御することで、目的タンパク質の発現を制御することができます。この調節効果は、IPTG の lac への結合に基づいています。ラクトースオペロンの生成物を分解し、その立体構造を変化させることにより、lacO が残り、さらに転写が活性化されます。この誘導可能な転写制御機構により、IPTG は遺伝子機能、タンパク質相互作用、薬物スクリーニングなどの研究分野において非常に重要になります。

3. タンパク質の結晶化:

 

タンパク質の結晶化実験では、IPTG はタンパク質の結晶化を促進する誘導剤として使用されます。その作用機序は、タンパク質の疎水性領域に結合してタンパク質の立体構造を変化させ、それによってタンパク質分子間の凝集と結晶化を促進することです。この凝集と結晶化のプロセスは可逆的であるため、IPTG を添加することでタンパク質の結晶化を誘導したり、IPTG を除去することでタンパク質の結晶を溶解したりすることができます。

タンパク質の結晶化実験では、通常、IPTG は最終濃度 1 mM でタンパク質溶液に添加されます。この低濃度の IPTG により、タンパク質の過剰な誘導が回避され、より優れた結晶化効果が得られます。同時に、IPTG はタンパク質の正しいフォールディングと凝集を助ける分子シャペロンとしても機能し、それによってより均一なタンパク質結晶が得られます。
IPTG はすべての場合においてタンパク質の結晶化を促進するわけではないことに注意してください。一部のタンパク質は IPTG に感受性がないか、その固有の構造や特性が結晶化に適していないため、最適な結晶化条件と方法を決定するには、さまざまなタンパク質に対して実験による検証と最適化が必要です。

細胞毒性

 

原核細胞に対する毒性

IPTG は原核細胞の遺伝子発現を誘導するために一般的に使用されますが、高濃度の IPTG は原核細胞に毒性を及ぼす可能性があります。研究によると、IPTG 濃度が高すぎると、細胞内の正常な代謝プロセスが妨げられる可能性があります。例えば、細胞のエネルギー代謝に影響を及ぼし、解糖やトリカルボン酸回路などの経路を妨害し、細胞内ATP産生の減少を引き起こし、細胞の成長や増殖に影響を与える可能性があります。さらに、高濃度のIPTGは細胞膜の完全性を損傷し、その透過性を高め、細胞内物質の漏出を引き起こし、細胞外環境から有害な物質が細胞内に侵入することを可能にし、それによって細胞死を引き起こす可能性があります。実験の結果、高濃度のIPTGを含む培地で大腸菌を培養すると、菌の増殖速度が大幅に低下し、培養時間の延長とともに生菌数が徐々に減少することが分かりました。これは、高濃度の IPTG が大腸菌に対して一定の阻害効果と死滅効果を持っていることを示しています。

真核細胞に対する毒性

原核細胞に加えて、IPTG は真核細胞にも有毒である可能性があります。真核細胞と原核細胞の間には構造と機能に一定の違いがありますが、IPTG は依然としてさまざまな経路を通じて真核細胞の正常な生理学的機能に影響を与える可能性があります。一方で、IPTG は真核細胞内のシグナル伝達経路を妨害する可能性があります。細胞内のシグナル伝達は、成長、分化、アポトーシスなどのプロセスにおいて重要な制御役割を果たします。 IPTGは、細胞内の特定のシグナル伝達分子と相互作用することによってシグナル伝達の強度と方向を変化させ、それによって細胞の正常な生理学的活動に影響を与える可能性があります。

真核細胞に対する毒性

一方、IPTG は真核細胞において酸化ストレス応答を誘導する可能性があります。酸化ストレスとは、細胞内酸化と抗酸化活性の間の不均衡を指し、活性酸素種 (ROS) 生成の増加につながります。過剰な ROS は、細胞内の DNA、タンパク質、脂質などの生体分子を攻撃し、細胞の損傷や機能障害を引き起こす可能性があります。研究により、特定の条件下で真核細胞のIPTG処理により細胞内ROSレベルが大幅に増加し、細胞生存率の低下とアポトーシス率の増加が伴うことが判明しました。これは、IPTG が酸化ストレス応答を誘導し、真核細胞に対して毒性を及ぼす可能性があることを示唆しています。

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