テトラメチルベンジジン CAS 54827-17-7
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テトラメチルベンジジン CAS 54827-17-7

テトラメチルベンジジン CAS 54827-17-7

商品コード:BM-1-2-046
英語名:テトラメチルベンジジン
CAS番号: 54827-17-7
分子式:C16H20N2
分子量:240.34
EINECS番号:259-364-6
MDL番号:MFCD00007748
コード: 29215990
主な市場: 米国、オーストラリア、ブラジル、日本、英国、ニュージーランド、カナダなど。
メーカー: ブルームテック銀川工場
技術サービス:研究開発第一部
用途:薬物動態研究、受容体抵抗性試験など。

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テトラメチルベンジジン(TMB)、CAS 54827-17-7 は、分子式 C16H20N2 の化学物質で、ペルオキシダーゼおよび B 型肝炎抗原の染色剤として使用されます。白色から黄色の粉末。 TMB は、ELISA 反応におけるカタラーゼの基質として使用されます。この基質は可溶性の水色の最終生成物を生成することができ、これは分光光度計で 370 または 620 ~ 650 nm で読み取ることができます。 TMB 反応は 2 M H2SO4 (黄色) で停止させることができ、450 nm で読み取ることができます。したがって、TMB は血液、ヘモグロビン、ペルオキシダーゼの測定に使用される高感度かつ特異的な試薬です。 TMB は非発がん性発色試薬として、酵素免疫吸着法 (ELISA)、臨床生化学検査などの分野で広く使用されています。

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化学式

C16H20N2

正確な質量

240

分子量

240

m/z

240 (100.0%), 241 (17.3%), 242 (1.4%)

元素分析

C, 79.96; H, 8.39; N, 11.66

CAS 54827-17-7 Tetramethylbenzidine structure | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

Tetramethylbenzidine | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

検出感度が高く、安定性が高いため、従来の発がん性のあるベンジジン試薬を置き換えることができます。主に、肝炎ウイルス検出、妊娠検査、便潜血分析などの 10 を超える検出プロジェクトに使用され、医療診断、法医学的識別、環境モニタリングのシナリオをカバーしています。

 

Usage

 

従来の比色試薬とは異なり、テトラメチルベンジジン従来のベンジジン試薬よりも 10 倍以上高い検出感度を持ち、最小検出限界はナノモルレベルまでです。この比色製品は水溶性が良く、沈殿が発生しないため、完全自動化されたハイスループット免疫測定装置のアプリケーション要件を完全に満たしています。-現在の世界的なIVD業界において不可欠な核心原料です。

Tetramethylbenzidine reagent | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

臨床体外診断分野におけるコア発色基質の使用

臨床体外診断の分野では、TMB は酵素結合免疫吸着検定法 (ELISA) の中心となる発色基質であり、大多数の免疫検定キットの中心となる機能成分です。{0}感染症の血清学的検出の場面では、背景色が極めて低く検出感度が高い、TMB 発色系に基づいて BB 型肝炎、C 型肝炎抗体、エイズ抗体などの感染症をスクリーニングするための ELISA キットが、国内の血液検査所における大規模な血液スクリーニングの主流の技術方式となっています。-

国内の血液ステーションの申請データによると、発色基質としてTMBを使用した血液スクリーニングキットでは、BB型肝炎表面抗原の最小検出限界が0.1IU/mLに達する可能性があります。

従来の OPD 発色システムと比較して、偽陰性の見逃し率が 90% 減少し、輸血関連感染症の伝播リスクを根源から完全にブロックします。三次病院における日常的な外来感染症スクリーニングでは、TMB 比色システム ELISA キットは検出結果のバッチ間の差異を 5% 以内に制御し、従来の方法と比較して検出速度を 2 倍にし、1 日あたり数千のサンプルのハイスループット検査を完了できます。-

Tetramethylbenzidine uses | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd
Tetramethylbenzidine disease | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

大規模集団における感染症の早期スクリーニングのニーズを完全に満たします。-ホルモンや腫瘍マーカーの臨床検出では、TMB 比色システムの高感度の利点がさらに強調されます。 TSH、T3、T4などの甲状腺機能ホルモン指標の検出において、TMB発色の動的直線範囲は従来の発色試薬よりも3倍広く、健康な人から甲状腺機能亢進症および甲状腺機能低下症の患者までの全濃度範囲を正確にカバーでき、高濃度サンプルでのフック効果によって引き起こされる誤警報を回避できます。

腫瘍マーカーの臨床検出では、TMB ベースの ELISA キットは、血清中のわずか数 ng/mL の濃度で CEA や AFP などの腫瘍マーカーを正確に検出でき、癌の早期スクリーニングおよび術後の再発モニタリングに信頼できる定量的結果を提供します。

中国の三次病院の病理部門の統計データによると、TMB 比色腫瘍マーカー組み合わせ検出スキームを使用した早期消化管腫瘍の検出率は、従来の方法より 25% 高いことが示されています。金コロイド法以外の酵素発色の中核成分として、新型コロナウイルス感染症抗原(TMB)を迅速に検出する補助診断シナリオ。

Tetramethylbenzidine concentration | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd
Tetramethylbenzidine cancer  | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

これは、-新型コロナウイルス -19 抗原のハイスループット ELISA 検出システムに応用されています。従来の金コロイド法に比べ検出感度が一桁高く、ウイルス量が少ない段階での陽性検出が可能であり、早期感染者の見逃し率を大幅に低減します。全自動化学発光イムノアッセイのサポート システムにおいて、TMB はホースラディッシュ ペルオキシダーゼ (HRP) 直接化学発光の強化された基質として、発光シグナルの強度と安定性を大幅に向上させ、化学発光検出の信号対雑音比を 4 倍増加させ、検出結果の CV 値を 3% 以内に制御し、ハイエンドの高精度検出要件を完全に満たします。-全自動免疫測定装置。

生物学研究および分子生物学の分野で広く応用されています

生物学研究の分野では、テトラメチルベンジジンは、ウエスタンブロット実験における HRP 標識二次抗体の発色基質として推奨されており、分子生物学研究室で最も一般的に使用される発色試薬の 1 つです。従来のウェスタンブロット実験では、TMB 化学発光増強比色システムを使用することで、pg レベルの標的タンパク質を検出できます。

Tetramethylbenzidine field | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd
Tetramethylbenzidine lab | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

従来の DAB 比色法と比較して検出感度が 2 桁向上し、細胞内の少量のシグナル伝達経路タンパク質や転写因子の発現変化を容易に識別できます。国内の大学の生物学研究室の比較実験データによると、最適化された TMB 高感度発光溶液を使用すると、ウエスタン ブロットの展開時間が従来の 30 分から 10 秒未満に短縮され、きれいなバックグラウンド バンドと不純物がなくなったことが示されています。{1}分子量差がわずか 1kDa の 2 つの類似したタンパク質バンドを明確に区別できるため、タンパク質イムノブロッティング実験の信頼性が大幅に向上します。

免疫組織化学および免疫組織化学の実験シナリオでは、改良された TMB 染色システムにより、安定した青色の不溶性産物を生成し、組織切片や細胞スライド内の標的タンパク質の発現位置を正確に特定できます。従来の DAB 黄褐色染色と比較して、青色 TMB 染色製品はヘマトキシリンで染色された青紫の核と柔らかい色の区別を形成し、DAB 染色によくあるエッジ拡散やバックグラウンドの非特異的染色の問題がありません。{1}}神経組織における神経伝達物質タンパク質の局在化および腫瘍組織におけるPD-L1タンパク質発現の解釈の実験。

Tetramethylbenzidine slices | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd
Tetramethylbenzidine based | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

TMB 染色結果の認識は従来の染色方法よりも大幅に優れており、研究者がタンパク質の細胞内局在の形態をより正確に観察するのに役立ちます。

酵素活性分析の基礎研究シナリオでは、TMB は微量のペルオキシダーゼ活性を測定するための特異的な基質です。 TMB 酸化比色分光光度法に基づいて、サンプル中の 1ng/mL という低濃度の HRP 酵素活性を正確に検出できます。これは、植物のペルオキシダーゼと微生物の抗酸化酵素の活性を研究するための古典的な実験方法です。単一分子酵素学の最前線の研究では、固定化された TMB 分子は、単一の HRP 酵素分子の触媒作用により局所的な色の沈殿物を生成する可能性があります。

単一酵素分子の空間分布と触媒速度論は光学顕微鏡で直接観察でき、単一分子酵素学の基礎研究に直感的な観察方法を提供します。{0}核酸ハイブリダイゼーションの検出シナリオでは、HRP が核酸プローブに標識され、サンプル中の標的核酸配列が TMB 色強度によって定量的に検出されます。複雑な蛍光検出装置を必要とせず、低コストで核酸の定性的および定量的検出を完了できます。-これは、草の根科学研究機関における遺伝子タイピングや遺伝子組み換え成分のスクリーニング実験に広く使用されています。

Tetramethylbenzidine enzyme | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd
Tetramethylbenzidine environmental | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

環境モニタリングおよび食品安全分野における高感度検出アプリケーション

環境モニタリングの分野では、テトラメチルベンジジンは、水中の微量の過酸化水素および重金属イオンを迅速に検出するための高感度酸化比色試薬として広く使用されています。飲料水の安全性試験のシナリオでは、TMB ベースのペルオキシダーゼ シミュレーション比色検出システムは、国の飲料水衛生基準の制限要件をはるかに下回る 0.01mg/L という低さの飲料水中の残留過酸化水素消毒剤を迅速に検出できます。

検出には大型の機器を必要とせず、液の青みの深さを肉眼で観察するだけで半定量判定ができるため、現場での緊急水質監視に最適です。水域中の鉛や水銀などの重金属イオンの検出シナリオでは、官能化ナノゴールド模擬ペルオキシダーゼは重金属イオンに特異的に応答できます。 TMB の色強度の変更により、重金属イオンの高選択的可視化検出が実現でき、検出限界は最大 1nM、検出コストは従来の原子吸光分光法のわずか 1% です。

Tetramethylbenzidine metal | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd
Tetramethylbenzidine testing | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

これは、農村部の飲料水の安全性スクリーニングや産業廃水排出現場の迅速な監視において、非常に高い応用価値を示しています。

食品安全性検査の分野では、TMB はさまざまな迅速検出テストストリップの中心となる発色成分です。食品中の残留農薬の酵素阻害検出のシナリオでは、有機リン系農薬とカルバメート系農薬がアセチルコリンエステラーゼの活性を阻害します。ペルオキシダーゼ触媒による TMB の色変化の組み合わせにより、野菜に残留する農薬の現場スクリーニングを 10 分以内に迅速に完了できます。-

検出感度は国家食品安全基準の制限要件を満たしており、国内の農産物市場や草の根規制部門で最も一般的に使用されている残留農薬の迅速検出方法です。食品に違法に添加されたクレンブテロールやメラミンなどの小分子汚染物質の金コロイドイムノクロマトグラフィー検出において、TMB に基づく酵素触媒強化比色技術により、従来の金コロイドテストストリップの検出感度が 10 倍以上向上し、低濃度の違法添加物の正確な検出が達成され、偽陰性や検出の見逃しの可能性が大幅に低減されます。

Tetramethylbenzidine detection | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd
Tetramethylbenzidine lines | Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd

食品中の微生物汚染を迅速に検出するシナリオでは、微生物の代謝中に生成される過酸化水素とTMB呈色反応を組み合わせることで、食品中の細菌の総数の半定量的スクリーニングを2時間以内に迅速に完了できます。従来の48時間のプレート培養法と比較して、検出時間が大幅に短縮され、食品製造企業の食品生産ラインの迅速な品質管理に非常に適しています。穀物および油脂食品中のアフラトキシン B1 の迅速検出において、TMB ベースの ELISA 検出システムの最小検出限界は 0.1 μ g/kg であり、国民食品中のアフラトキシンの厳格な限界要件を完全に満たしています。検出コストは、大型の機器を使用する質量分析検出方法よりもはるかに低いため、大規模な穀物や油の食品安全性調査に適しています。-

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の調製方法テトラメチルベンジジン、具体的な手順は次のとおりです。

 

(1) 2,6-ジメチルアニリンを無水エタノールに加え、触媒を含む脱イオン水溶液を加え、35度以下の温度で反応させた後、酸化剤を滴下し、固体を抽出して活性化2,6-ジメチルアニリンを得る。

 

(2) 活性化 2,6-ジメチルアニリンを溶解したテトラヒドロフラン溶液を塩化アンモニウム水溶液に加え、氷酢酸と金属触媒を加えます。反応が完了したら、テトラヒドロフラン層を分離し、それを塩酸溶液に加え、固体を濾過して、3,3,5,5-テトラメチルビフェニルの粗生成物を得る。

 

(3) 3,3,5,5-テトラメチルビフェニルの粗生成物をメタノールに加え、亜鉛粉末を加え、50~70度に加熱して反応させ、熱いうちに濾過し、濃縮してエタノールに加え、加熱を続けて溶解し、濾過後の濾液を濃縮して、3,3,3,5,5-テトラメチルビフェニルの純粋な生成物を得る。

この方法は効果的かつ簡単で、危険な原材料の使用を回避するだけでなく、製品収率も高く、工業生産に適しています。

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重要な色原体試薬です。従来の色原体試薬(ベンジジンなど)と比較して、高い検出感度と優れた安定性という利点があり、発がん性や変異原性の影響がなく、安全に使用できます。現在、TMB は従来の色原体試薬に徐々に取って代わり、臨床検査、法医学検査、犯罪発見、環境モニタリングに応用されています。特に臨床生化学検査では、TMB はペルオキシダーゼの新しい基質として、酵素免疫測定法や酵素結合免疫吸着測定法で広く使用されています。-ただし価格が高いため、合成方法を検討することが非常に重要です。

よくある質問
 

テトラメチルベンジジンは何に使用されますか?

3,3',5,5'-テトラメチルベンジジン(TMB)は、高い吸収係数を持つ反応生成物を生成し、発がん性がないため、ホースラディッシュ ペルオキシダーゼ-ベースの検出システムに広く使用されている色原体です。

テトラメチルベンジジンは有毒ですか?

皮膚に接触すると感作を引き起こす可能性があります。吸入、皮膚との接触、飲み込むと有害。目、呼吸器系、皮膚を刺激します。水生生物に対して非常に有毒であり、水生環境に長期的な悪影響を引き起こす可能性があります。-

TMBの機能は何ですか?

TMB は西洋わさびペルオキシダーゼの発色基質です。酵素によって酸化されると、この基質は 370nm と 652nm で吸収する青色の生成物を生成します。硫酸またはリン酸を加えて反応を停止すると、生成物は 450nm で吸収される黄色に変化します。

テトラメチルベンジジンはどのようなものですか?

これは白色の固体で、酢酸エチルを加えると淡青緑色の液体になります。-この製品は太陽光や蛍光灯によって劣化します[1]。テトラメチルベンジジンは、西洋わさびペルオキシダーゼなどのペルオキシダーゼ酵素によって過酸化水素を水に還元するための水素供与体として機能します。

 

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