L -チロシンパウダーCAS 60-18-4

家畜の改善と家禽の生産性能
0.2％l -チロシンを豚肉食に追加すると、毎日の体重増加が8％増加し、飼料変換率が6％増加する可能性があります。そのメカニズムは、成長ホルモン分泌と腸の発達の促進に関連しています。
水生動物のストレス耐性の強化
0.1％l -チロシンを南アメリカの白いエビの飼料に添加すると、酸素耐性が低くなり、水産養殖の生存率が12％増加する可能性があります。
ペットフードの機能化
猫にとって必須アミノ酸として、欠乏によって引き起こされる皮膚病変を防ぐことができます。 l -チロシンを老犬の食物に追加することは、認知障害を改善し、空間記憶能力を高めることができます。

研究分野：細胞培養と生化学研究のためのコア試薬

血清-遊離培養媒体の開発
L -チロシンは、CHO細胞やHEK293細胞などの血清-自由培地の不可欠な成分です。モノクローナル抗体産生では、L -チロシンを補充すると、細胞アポトーシス率を低下させながら抗体産生を15％増加させることができます。
タンパク質構造と機能に関する研究
ペプチド窒素含有量を決定するための標準として、ミロン反応における比較定量分析に使用されます。その誘導体蛍光標識チロシン（FITC Tyr）は、タンパク質相互作用研究で広く使用されています。

疾患モデルの構築
パーキンソン病の疾患細胞モデルでは、代謝異常に関する研究は、神経変性疾患のメカニズムの重要な手がかりを提供します。

1。酵素法：

微生物形質転換法としても知られる酵素法は、主に微生物細胞でチロシンフェノールリアーゼ（TPL、EC 4.1.99.2）を使用して、フェノール、ピルビン酸、アンモニアまたはフェノールを変換し、L -セリンにL- Tyrinineに変換します。より高い酵素活性とより多くの研究結果を備えたTPLは、主に微生物Erwinia Herbicola、Citrobacter Intermedius、Citrobacter Freundii、および好熱性菌から来ています。 Genex CompanyのLeeとHsiaoは、Klebsiella aerines serine HydroxyltransferaseおよびErwinia herbicola ATCC 21434チロシンフェノールリアーゼを使用して、合成L - Serine with Glysizing Lisizing Lisizing Lisizing Lisizing Lisizing Lisizing Lisizing Lisizing Lisizing Lisizing Lisizeの反応を結合する最初の人物でした。 1986年の基質としてのL -セリン。0.32％フェノール、0.25 mグリシン、0.5 mm 5 -ピリドキサルリン酸、500 mL反応系-メルカトエタノール、1.7 mMテトラヒドリフェオール。 pH 7.0および37度で、反応は37％のホルムアルデヒドで開始されました。 16時間後、26.3 g/ll -チロシンが生成され、グリシンの変換速度は61.4％に達しました。ただし、このプロセスの安定性は貧弱で、グリシンはTPL活性に強い阻害効果があります。反応プロセスにおける酵素活性の低さと安定性を考慮すると、TPLの安定性を改善するためのDNAシャッフル技術の使用も近年注目を集めています。ユージン等。韓国のKRIBBのうち、AS6変異体が得られ、触媒活性が3倍に増加し、半分の不活性化温度が11.2度増加し、Symbiobacterium ToEBIIおよびStaggered DNAシャッフルにおけるTPLのランダム変異スクリーニングによって増加しました。シーケンスの結果は、触媒活性領域にT129IまたはT451A変異が存在することを示し、A13V、E83K、およびT407Aを含む3つの変異が熱安定性を改善するために大きな助けになることが示されました。およびキムら。 E COLI BL21（DE3）のこの研究グループのうち、触媒活性と熱安定性が改善されたTPLを発現し、粗触媒抽出物を調製しました。 In the 2.5L flow addition reactor system, 2.2 M phenol, 2.4 M sodium pyruvate, 0.4 mM 5-pyridoxal phosphate and 4 M ammonium chloride were added in batches, and nitrogen was filled above the reaction tank to reduce the oxidation of substrate. 130 g/L L-tyrosine could be accumulated after reaction at 40℃for 30 hours, and the highest conversion rateフェノールの94％に達する可能性があります。

2。微生物発酵：

微生物発酵は通常、グリセロール、グルコース、その他のバイオマス炭素源を原料として摂取し、適切な条件下で優れた微生物株の発酵によりL -チロシンを蓄積します。初期の研究では、多くの場合、人工変異誘発を選択して選択しましたl -チロシン粉末L -フェニルアラニンまたはl -トリプトファン欠損または抗フィードバック阻害株などのスクリーニングL -フェニルアラニンなどの高-収率株。しかし、ほとんどの微生物が芳香族アミノ酸を蓄積する能力は非常に低く、それらの代謝経路の調節メカニズムは非常に複雑です。従来の突然変異の繁殖方法は、局所代謝経路または重要な酵素にのみ作用することができ、全体的なL -チロシン代謝流に大きな影響を与えることは困難です。近年、代謝工学とさまざまな高度なバイオテクノロジーの急速な発展に伴い、微生物の代謝経路を再設計するための研究ホットスポットになり、L -チロシンの発酵をよりよく実現します。 L -チロシン代謝工学菌には、主にEscherichia coli、Corynebacterium glutamicum、Brevibacterium flavum、subtilisが含まれます。その中で、大腸菌およびglutamicumのl -チロシンの合成経路と調節メカニズムが最も研究されており、最も明確に説明されています。

l -チロシン生合成経路は、芳香族アミノ酸生合成経路に属します。その合成の前駆体、エリスロス- 4 -リン酸（E4P）、およびホスホエノールピルビン酸（PEP）は、DAHPシンテターゼ（DS）の触媒作用下で凝縮して凝縮して産生して産生します。 3 - deoxy {- d -アラビノゲプタノシル{- 7 -リン酸（DAHP）（DAHP）は、L -チロシン生合成経路の初回制限ステップでもあります。大腸菌では、DAHPシンテターゼには3つのイソ酵素が含まれています：arog、arof、aroh。その発現と活性は、それぞれl -フェニルアラニン、L -チロシンとL-トリプトファンの製品のフィードバックによって阻害および抑制されます。 DAHPから分岐酸への7段階の反応は、すべての芳香族アミノ酸の一般的な経路です。分岐酸は、芳香族アミノ酸合成経路の分岐点です。 1つの枝の経路は、L-トリプトファンを合成するために使用され、もう1つの部分は、分岐酸ミューターゼ（CM）および前脂肪脱水症（PD）バイフィクション型酵素Tyraの作用下で4-ヒドロキシフェニルピルビン酸（4HPP）を生成します。後者は、L-グルタミン酸とのトランスアミノ化によりL-チロシンを生成し、Tyraの発現と活性もL-チロシンのフィードバックによって阻害されました。

3。抽出方法：

抽出方法は、1820年にBracannotによって最初に発明されました。彼は、ゼラチンシープスキンと筋肉加水分解物からグリシンとロイシンを抽出しました。その後、Bopp et al。タンパク質から徐々に加水分解したチロシンとセリン。アミノ酸生成の最も古いプロセス、すなわち白質加水分解抽出。タンパク質は酵素、酸、または創意工夫によって加水分解され、最終生成物はアミノ酸. 6 M塩酸酸が一般的に12〜24時間加水分解するために使用されます。過剰酸を除去した後、さまざまなアミノ酸の混合物が抽出されます。最後に、アミノ酸の相対純度は、溶解度の違いまたはイオン交換樹脂の方法によって得られました。

1930年代と1940年代までに、抽出方法を使用して20種類以上のアミノ酸を取得できました。最も有名なアミノ酸産業は、グルタミン酸モノソジウムです。今日、ほとんどのアミノ酸はさまざまなリソースから抽出することができますが、リソースの高コスト、低収量、環境汚染、その他の理由により、大規模な-スケール生産を継続することは適していません。心臓チロシンの産生のための抽出方法は、一般に、天然タンパク質資源を原料、加水分解、濃度、結晶化、脱色、および心臓チロシンを分離および抽出するためのその他のステップとして使用することです。ただし、抽出された生成物中のL -チラミンの含有量は低いため、抽出方法の収率は実際には低いため、大規模な-スケール生産には適していません。

4。化学合成法l -チロシン粉末:

化学合成は19世紀以来アミノ酸の合成に使用されてきましたが、化学合成がアミノ酸を合成するために使用されたのは1950年代まででした。この方法は、有機合成と化学工学の技術を使用してアミノ酸を生成します。その最大の利点は、さまざまなアミノ酸によって制限されていないことです。天然アミノ酸の調製に加えて、非常に特別な構造を持ついくつかのアミノ酸を含む非天然アミノ酸を生成することもでき、大規模に生成できます。ただし、化学的方法には欠点もあります。主な問題は、プロセスが比較的複雑であることです。アミノ酸のdおよびl -タイプのラセメート型のみを合成できます。光学分解能の後にのみ、光学的活性アミノ酸を取得できます。これまで、多くのアミノ酸は、飼料で広く使用されている化学合成、特にDおよびL -メチオニンによって依然として生成されています。生産方法は化学合成のみであり、出力は年間約10万トン/年です。さらに、医薬品および食用グリシンの大きな-スケール生産方法も化学合成L -チロシンです。